二手沃特世液相色譜儀系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統，樣品溶液經進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱（固定相）內，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數，在兩相中作相對運動時，經過反復多次的吸附-解吸的分配過程，二手沃特世液相色譜儀各組分在移動速度上產生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內流出，通過檢測器時，樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀，數據以圖譜形式打印出來。二手沃特世液相色譜儀主要有進樣系統、輸液系統、分離系統、檢測系統和數據處理系統。二手沃特世液相色譜儀對高沸點、難氣化合物的混合物通過色譜柱核淋洗劑并以實現分離。

　　對二手沃特世液相色譜儀的要求:

　　1.流動相必須用HPLC級的試劑，二手沃特世液相色譜儀使用前過濾除去其中的顆粒性雜質和其他物質(使用0.45μm或更細的膜過濾)。

　　2.流動相過濾后要用超聲波脫氣，脫氣后應該恢復到室溫后使用。

　　3.不能用純乙腈作為流動相，這樣會使單向閥粘住而導致泵不進液。

　　4.使用緩沖溶液時，做完樣品后應立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時，然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上，以充分洗去離子。對于柱塞桿外部，做完樣品后也必須用去離子水沖洗20mL以上。

　　5.長時間不用二手沃特世液相色譜儀，應該將柱子取下用堵頭封好保存，注意不能用純水保存柱子，而應該用有機相(如，甲醇等)，因為，純水易長霉。

　　6.每次做完樣品后應該用溶解樣品的溶劑清洗進樣器。

　　7.氣泡會致使壓力不穩，重現性差，所以在使用過程中要盡量避免產生氣泡。

　　8.如果進液管內不進液體時，要使用注射器吸液：通常在輸液前要進行流動相的清洗。

　　9.要注意柱子的pH值范圍，不得注射強酸強堿的樣品，特別是堿性樣品。

　　10.更換流動相時應該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗，然后插入新的流動相中。二手沃特世液相色譜儀更換無互溶性的流動相時要用異丙醇過渡一下。